Предварительная мацерация

К явным достоинствам ферментативного метода разрушения тканей следует также отнести возможность получения гомогенного препарата интактных, высокоактивных хлоропластов. Недостатками ферментативного метода выделения хлоропластов, по-видимому, являются: невозможность использования этого метода для некоторых видов растений, большая его продолжительность из-за предварительной мацерации ткани, необходимость подбора минимального времени мацерации и способов очистки протопластов с целью избежания побочного действия гидролизующих ферментов, ограниченный выход органелл.

Методы выделения хлоропластов при механическом разрушении тканей отличаются быстротой, достаточной простотой и более высоким выходом хлоропластов, но при этом существует большая вероятность повреждения хлоропластов, снижения их активности и, как отмечалось выше, агрегации органелл.

Данный метод включает растирание навески листьев со средой выделения, приготовление гомогената и его последующее центрифугирование со скоростями, позволяющими отделить фракцию хлоропластов от других более тяжелых и более легких компонентов клетки. В качестве среды выделения могут быть взяты водные растворы хлористого натрия, сахарозы, сорбитола с определенной величиной осмотического давления или безводные органические среды.