Нанесение вытяжки
Для удобства нанесения вытяжки бумагу можно закрепить на специальном штативе. Участок бумаги, на который наносят раствор пигментов, необходимо поместить над прорезью штатива. Снизу бумагу подсушивают током воздуха.
Объем наносимой вытяжки зависит от плотности бумаги и концентрации пигментов в вытяжке. Количество пигментов после разделения должно быть достаточным для их последующего количественного определения. При этом надо учитывать, что с увеличением концентрации вещества на единицу площади бумаги затрудняется разделение пигментов на хроматограмме. Ввиду этого необходимо предварительно подобрать объем вытяжки, оптимальный для проведения хроматографии.
Окрашенные полосы, соответствующие каротину и двум ксантофиллам, вырезают, измельчают и переносят в отдельные бюк — сы на 25 мл. Для лучшей элюции бумагу обрабатывают этиловым эфиром. Затем пигменты элюируют смесью этилового спирта и ацетона. Растворитель добавляют небольшими порциями, каждый раз настаивая 2 — 3 мин. Экстракт аккуратно сливают в мерные пробирки. Элюцию проводят до полного обесцвечивания бумаги. Объем полученных элюатов не должен превышать 3 — 4 мл. Полученные экстракты используют для спектрофотометрического анализа.