Распределение веществ
Хроматография основана на распределении веществ между двумя фазами — неподвижной, которая бывает твердой или жидкой, и подвижной, содержащей исследуемую смесь веществ, — она пропускается через неподвижную фазу. Распределение веществ между двумя фазами характеризуется «коэффициентом распределения», т. е. отношением концентрации вещества в подвижной фазе и его концентрации в неподвижной фазе. Вещества с более высоким коэффициентом распределения продвигаются по сорбенту с большей скоростью, отделяясь от веществ с более низким коэффициентом.
Методы хроматографического анализа в зависимости от сил, действующих между разделяемыми веществами и поверхностью твердой или жидкой фазы, с которой они соприкасаются, можно разделить на три группы: адсорбционная хроматография; распределительная хроматография; осадочная хроматография.
В Молекулярной хроматографии вещества адсорбируются на материале колонки под действием межмолекулярных сил. Для каждого компонента смеси эти силы различны. Поэтому если раствор, содержащий смесь пигментов, пропускать через слой сорбента, то пигменты располагаются в колонке в виде отдельных различно окрашенных зон. В верхней части колонки задерживаются наиболее прочно связываемые сорбентом компоненты, а ниже будут находиться менее прочно связываемые. Все анализируемые компоненты в зависимости от относительного адсорбционного сродства к сорбенту образуют адсорбционный ряд — А, В, С,…. При промывании колонки чистым растворителем вещества будут вымываться из верхних слоев и вновь адсорбироваться в нижних слоях по Закону адсорбционного замещения М. С. Цвета: компонент смеси, обладающий большим адсорбционным сродством к сорбенту, вытесняет другие компоненты.