Реакции фотосинтеза
Одним из подходов к оценке активности темновых реакций фотосинтеза, осуществляющих фиксацию углекислого газа и синтез метаболитов, является определение активности ферментов цикла Кальвина. Особый интерес при этом представляют ферменты, регулирующие активность темновых реакций фотосинтеза в целом.
Прогресс в изучении фотосинтеза как в целом, так и отдельных его реакций связан с возможностью получения изолированных фотосинтезирующих органелл клетки — хлоропластов, и отдельных структурно-функциональных компонентов фотосинте — тического аппарата — тилакоидов и мультипротеиновых комплексов мембран хлоропластов. В настоящее время разработаны различные методы выделения названных компонентов. Они позволяют получить препараты с различной степенью очистки, ин — тактности и функциональной активности. Выбор методики выделения фотосинтезирующих частиц определяется целями исследования.
Интактные, достаточно хорошо очищенные от других субклеточных структур и биохимически активные хлоропласты необходимы для изучения метаболизма углерода, транспорта метаболитов в хлоропластах и компартментации ферментов в клетке. При установлении локализации ферментов, присутствующих в клетке в очень небольших количествах, необходимы препараты хлоропластов с очень высокой степенью очистки, функциональная активность при этом оказывается не столь значимой. Напротив, для других целей необходимо получение изолированных хлороплас — тов с максимальной активностью фотосинтеза, наличие же небольших примесей цитоплазматических ферментов при этом допустимо.