Тонкослойная хроматография

Тонкослойная хроматография на силикагеле находит широкое применение при исследовании пигментов фотосинтетического аппарата, причем часто используют коммерческие пластинки с тонким слоем силикагеля, например пластинки silufol. Особенно удобно использовать данные пластинки для анализа каротиноидов. При работе с зелеными пигментами в метод тонкослойной хроматографии на силикагеле вносят ряд модификаций. В последнее время появились коммерческие колонки с обращенной фазой, изготовленные на основе силикагеля. Эти колонки содержат гидрофобную фазу и могут использоваться для хроматографии и препаративного получения пигментов, в том числе и хлорофиллов, без их существенной деградации.

Пузырьки плотно закрывают тефлоновыми пробками с фиксаторами и помещают на 1 — 2 ч в термостат. После термоста — тирования пузырьки с пробами охлаждают, открывают и производят экстракцию неомыляемой фракции гексаном ; слой гексана после встряхиванияпробы и расслаивания отбирают шприцем. Пробы упаривают на роторном испарителе, растворяют в хлороформе и используют для хроматографии на силуфоловых пластинках. Промытую гексаном фракцию подкисляют, добавив к содержимому пенициллиновых пузырьков 0,2 мл 6 н. НС1, и вновь промывают гексаном несколько раз. При этом в гексан переходят жирные кислоты, полученные после омыления сложных эфиров. Данный препарат может быть использован для анализа жирных кислот методом газожидкостной хроматографии.