Анализ спектров флуоресценции

Анализ спектров флуоресценции при температуре жидкого азота дает возможность получить многостороннюю информацию о характере протекающих при фотосинтезе процессов. При температуре жидкого азота, вследствие ингибирования биохимических процессов и сопряженных с ними процессов преобразования энергии в фотохимических реакциях, резко возрастает квантовый выход флуоресценции. В этих условиях можно наблюдать интенсивную флуоресценцию не только второй, но и первой пигментной системы, которая в обычных условиях очень слабо флуоресцирует. Как видно на рис. 28, в спектре флуоресценции хлоропластов высших растений при 20 °С главный максимум расположен при 685 нм и более слабая широкая полоса появляется при 735 нм. При охлаждении хлоропластов до температуры -196 °С в спектре появляются три основные полосы: при 685, 695 и 735 нм. Максимум 685 обусловлен флуоресценцией коротковолновых форм пигментов, составляющих основную часть второй пигментной системы, в то время как полоса 735 принадлежит длинноволновым формам хлорофилла первой фотосистемы. Отличаясь по составу и соотношению длинноволновых и коротковолновых форм пигментов, первая и вторая пигментные системы при возбуждении дают различные спектры, которые различаются по интенсивности флуоресценции при 685 и 735 нм. На основании этого во многих работах метод низкотемпературной флуоресценции используется для характеристики фотохимической активности фотосистем в различных экспериментальных условиях.