Использование полярных сорбентов
При использовании полярных сорбентов прочность связи пигмент — сорбент зависит от полярности пигментов. Для разделения пигментов используют систему неполярных растворителей с примесью определенного количества полярного растворителя. В этой системе положение зоны пигмента на хроматограмме определяется силой его взаимодействия с полярным сорбентом и неполярным растворителем и скоростью передвижения зоны при промывании. Пигменты с наибольшей полярностью, образующие прочные связи с полярным сорбентом, задерживаются у линии старта, а неполярные пигменты, для которых характерны более прочные связи с неполярным растворителем, передвигаются с током растворителя и занимают наиболее отдаленное положение от места нанесения пигмента. Таким образом, зональное распределение компонентов смеси в колонке адсорбента отражает их относительное положение в адсорбционном ряду.
При разделении смеси пигментов методом молекулярной адсорбционной хроматографии могут быть использованы: а) стеклянные колонки, заполненные сорбентом; б) бумага или в) пластинки с тонким слоем сорбента.
Для разделения растительных пигментов в тонком слое используют различные сорбенты: глюкозу, сахарозу, маннит, целлюлозу, силикагель, окись алюминия, окись магния и др. Сорбенты различаются размерами частиц и степенью активности. Одним из наиболее активных сорбентов является окись алюминия; сахароза относится к группе менее активных сорбентов. Некоторые сорбенты стабилизируют пигменты и снижают опасность их разрушения при хроматографировании. При использовании в качестве сорбента силикагеля к нему обычно добавляют СаС03 и аскорбиновую кислоту, чтобы предохранить пигменты от разрушения. Особенно быстро окисляются ксантофиллы.
Толщина слоя сорбента в тонкослойной хроматографии достигает 0,1 —0,5 мм; стандартная толщина слоя — 0,25 мм.