Выбор длины волны

Выбор длины волны При спектрофотометрическом анализе методом абсорбционной спектрофотометрии необходим для работы в области наибольшей спектральной чувствительности. Как правило, измерения проводят при длине волны максимального поглощения света исследуемым веществом. Этим достигаются высокая чувствительность и точность количественных определений. Иногда спектр поглощения образующегося в реакции окрашенного комплекса мало отличается от исходного реагента по положению основного максимума, но имеет несколько иную форму спектра. В этом случае определения проводят при длине волны, где разность поглощения исходного и конечного продукта реакции максимальна.

Случаи отклонения от основных законов светопоглощения. Применение спектрофотометрических методов возможно только в том случае, если исследуемый раствор или вещество подчиняется за-, конам Бугера—Ламберта и Бера, т. е. существует пропорциональность между значениями оптической плотности, концентрации и толщины слоя исследуемого вещества. В этом случае график, где по оси абсцисс отложена концентрация вещества в растворе С, а по оси ординат — поглощение А, имеет вид прямой линии, выходящей из начала координат. При нарушении пропорциональности, причинами которой могут быть высокая концентрация молекул и их агрегация, высокая интенсивность света, недостаточная монохроматичность светового потока, изменение состояния вещества, использование данного метода невозможно.

Оптимальным для точного определения концентрации веществ является интервал поглощения в пределах 0,2 —0,8. При очень низких и высоких значениях поглощения намного возрастает процент ошибки. Относительная ошибка определения может быть снижена при использовании кюветы большей длины, т. е. при увеличении толщины слоя исследуемого вещества.

Применение и возможности абсорбционной спектрофотометрии. Различают два основных вида спектро — фотометрического анализа: фотоколориметрию и спектрофотометрию.