Миграция энергии
В последнее время значительно расширен круг вопросов, связанных с изучением ближайших предшественников хлорофилла. Количественные определения пигментов группы протохлорофилла проводятся во многих лабораториях в связи с изучением заключительных стадий биосинтеза хлорофилла и кинетики процессов фотопревращения различных форм протохлорофиллида в хлорофиллид, механизмов регуляции биосинтеза пигментов, а также общих вопросов метаболизма пигментов в растении. Количественные определения различных форм протохлорофиллида при одновременной регистрации их спектров флуоресценции могут дать представление об эффективности процессов миграции энергии между ними. Новым направлением работ являются исследования реакций биосинтеза пигментов в связи с формированием реакционных центров фотосистем I и II в хлоропластах, показавшие участие в них разных форм предшественников и разных типов протохлорофиллидоксидоредуктаз. Прове-дение всех этих исследований требует разработки и применения методов выделения и количественного определения отдельных форм пигментов группы протохлорофиллида.
Для характеристики пигментного фонда предшественников могут быть использованы методы хроматографии, разделение фитольных и бесфитольных форм пигментов с использованием полярных и неполярных растворителей, низкотемпературный флуоресцентный анализ.
Возможность применения этих методов обусловлена тем, что отдельные формы пигментов различаются по молекулярной структуре, полярности и спектральным характеристикам. Большинство пигментов группы протохлорофилла и хлорофилла имеют характерные спектры поглощения и флуоресценции. Но фитольные и бесфитольные формы пигментов нельзя разделить спектрально, так как их спектры поглощения и флуоресценции идентичны, однако они различаются по полярности и могут быть разделены хроматографически и путем применения различных растворителей.